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引言

在過(guò)去的一個(gè)世紀(jì)里，已經(jīng)開(kāi)發(fā)出化療和放療等強(qiáng)效治療方法來(lái)治療癌癥。不幸的是，這些方法通常缺乏足夠的選擇性，無(wú)法在避免不可耐受毒性的情況下使用足以根除癌細(xì)胞的高劑量。單克隆抗體能夠提供顯著擴(kuò)大治療窗口所需的高特異性水平，一些抗體甚至能夠區(qū)分僅相差一個(gè)氨基酸或一個(gè)翻譯后修飾的兩個(gè)抗原。

幾項(xiàng)關(guān)鍵技術(shù)的發(fā)展使得抗體能夠用于治療目的。首先，20世紀(jì)70年代開(kāi)發(fā)的雜交瘤系統(tǒng)允許生產(chǎn)和篩選針對(duì)人類抗原的高特異性小鼠單克隆抗體。其次，將人抗體恒定區(qū)移植到小鼠抗體可變區(qū)的能力產(chǎn)生了具有更好治療效果和更少不良反應(yīng)的嵌合抗體。第三，20世紀(jì)90年代轉(zhuǎn)基因小鼠模型和噬菌體展示系統(tǒng)的使用使得能夠生成針對(duì)癌癥靶點(diǎn)的全人源抗體。隨著這些技術(shù)進(jìn)步和臨床需求的增加，過(guò)去二十五年見(jiàn)證了基于抗體的新療法的爆炸式增長(zhǎng)。自1997年以來(lái)，已有超過(guò)五十種用于腫瘤學(xué)應(yīng)用的基于抗體的治療劑獲得美國(guó)食品和藥物管理局（FDA）和歐洲藥品管理局（EMA）的批準(zhǔn)。除了基于抗體的治療劑外，抗體片段還用于生成用于T細(xì)胞工程的嵌合抗原受體。

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一、抗體生成

一系列技術(shù)被用于識(shí)別靶向腫瘤抗原的治療性單克隆抗體或抗體片段。這些技術(shù)包括用靶抗原免疫嚙齒動(dòng)物、噬菌體或酵母展示等展示技術(shù)、從人和轉(zhuǎn)基因小鼠中進(jìn)行單B細(xì)胞克隆，以及從駱駝科動(dòng)物中識(shí)別單域抗體。具有臨床實(shí)用性的抗體的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)涉及抗體工程，使其逐漸與人類免疫系統(tǒng)更加兼容。

嵌合和人源化抗體

單克隆抗體傳統(tǒng)上是通過(guò)使用1975年Cesar Milstein和Georges Kohler開(kāi)發(fā)的雜交瘤技術(shù)生產(chǎn)的。在此過(guò)程中，用特定抗原免疫后，從小鼠脾臟或淋巴結(jié)中分離B細(xì)胞，然后與骨髓瘤細(xì)胞系（如Sp2/0）融合，形成稱為雜交瘤細(xì)胞系的雜交細(xì)胞。通常通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定篩選蛋白質(zhì)結(jié)合，通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)篩選細(xì)胞結(jié)合來(lái)篩選雜交瘤克隆。雜交瘤技術(shù)穩(wěn)健且經(jīng)濟(jì)高效地產(chǎn)生了一系列小鼠單克隆抗體。然而，注入人體的小鼠抗體會(huì)產(chǎn)生人抗鼠抗體免疫反應(yīng)，限制了其療效并增加了不良反應(yīng)。因此，大多數(shù)獲得監(jiān)管批準(zhǔn)的小鼠抗體后來(lái)都被撤市。Blinatumomab是一種使用兩個(gè)小鼠來(lái)源的單鏈可變片段格式且缺乏Fc片段的雙特異性T細(xì)胞銜接器，是唯一在臨床得到廣泛采用的鼠源抗體。

為了減少患者免疫反應(yīng)的誘導(dǎo)，將小鼠抗體的恒定區(qū)替換為其人源對(duì)應(yīng)部分以產(chǎn)生嵌合抗體。利妥昔單抗和西妥昔單抗是最早產(chǎn)生的嵌合抗體之一，通過(guò)將小鼠抗體2B8和225的可變區(qū)連接到人免疫球蛋白G1重鏈和人κ輕鏈恒定區(qū)而生成。然而，具有鼠源可變區(qū)的嵌合抗體仍可被識(shí)別為外來(lái)物，導(dǎo)致可能清除治療性抗體的人抗嵌合抗體免疫反應(yīng)。這可能會(huì)限制嵌合抗體的重復(fù)應(yīng)用并阻礙其臨床開(kāi)發(fā)。為了進(jìn)一步減少不必要的免疫反應(yīng)，通過(guò)20世紀(jì)80年代開(kāi)發(fā)的稱為“人源化”的過(guò)程增加了小鼠單克隆抗體的人源含量。人源化涉及僅將小鼠抗體的互補(bǔ)決定區(qū)移植到人抗體的框架區(qū)。曲妥珠單抗是最早開(kāi)發(fā)的人源化抗體之一，通過(guò)將小鼠HER2抗體mumAb4D5的CDR移植到人抗體框架中而開(kāi)發(fā)，類似的策略被用于開(kāi)發(fā)奧比妥珠單抗、帕博利珠單抗和阿特珠單抗。

除了小鼠雜交瘤技術(shù)外，還開(kāi)發(fā)了兔雜交瘤用于生產(chǎn)針對(duì)腫瘤抗原（如間皮素）的兔單克隆抗體。CDR移植方法已被用于人源化兔單克隆抗體，例如針對(duì)間皮素的YP218，用于臨床開(kāi)發(fā)。監(jiān)管機(jī)構(gòu)批準(zhǔn)的大多數(shù)治療性抗體都是使用雜交瘤方法生成，然后工程化為嵌合或人源化形式，并廣泛用于癌癥治療。

人源抗體

借助20世紀(jì)90年代開(kāi)發(fā)的兩項(xiàng)技術(shù)，即人抗體噬菌體展示和人抗體表達(dá)轉(zhuǎn)基因小鼠模型，實(shí)現(xiàn)了生成全人源抗體的最后一步。為了生成產(chǎn)生人源抗體的轉(zhuǎn)基因小鼠，將人Ig基因座或可變區(qū)插入小鼠基因組，同時(shí)破壞小鼠Ig基因。從用靶抗原免疫的小鼠中分離B細(xì)胞用于單B細(xì)胞克隆和測(cè)序。轉(zhuǎn)基因小鼠平臺(tái)XenoMouse、VelocImmune和HuMab產(chǎn)生了九種獲批的靶向癌癥的人源抗體：達(dá)雷妥尤單抗、伊匹木單抗、納武利尤單抗、奧法木單抗、帕尼單抗、度伐利尤單抗、西米普利單抗、替索妥單抗和瑞拉利單抗。這些抗體成功的臨床開(kāi)發(fā)導(dǎo)致了多個(gè)轉(zhuǎn)基因小鼠平臺(tái)的迅速興起，例如KyMouse、OmniRat、H2L2 Mouse、Trianni Mouse和RenMab。

展示技術(shù)為人源抗體開(kāi)發(fā)提供了替代平臺(tái)。使用噬菌體展示，可以從多樣性超過(guò)10¹的大型文庫(kù)中分離人scFv或Fab片段。噬菌體展示技術(shù)通常使用M13絲狀噬菌體來(lái)表達(dá)與噬菌體pIII外殼蛋白融合的抗體片段，如scFv。用固定在微孔板或珠子上的靶抗原篩選噬菌體文庫(kù)。洗去非特異性噬菌體結(jié)合物，收獲剩余的特異性結(jié)合物用于下一輪篩選。通常需要三到五輪篩選來(lái)分離特異性結(jié)合物。這個(gè)過(guò)程稱為噬菌體淘選，它模擬了體外的免疫選擇。使用下一代測(cè)序的新方法有助于快速識(shí)別稀有結(jié)合物。

Dyax的噬菌體展示系統(tǒng)產(chǎn)生了三種獲得監(jiān)管批準(zhǔn)的全人源抗體：雷莫西單抗、奈西妥珠單抗和阿維魯單抗。此外，由Dyax、Cambridge Antibody Technology、MorphoSys等公司產(chǎn)生的多種噬菌體展示來(lái)源的人源抗體目前正在進(jìn)行臨床試驗(yàn)。轉(zhuǎn)基因小鼠和噬菌體展示技術(shù)都有其獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。通常，轉(zhuǎn)基因小鼠平臺(tái)傾向于產(chǎn)生具有更理想生物物理特性和在臨床試驗(yàn)中表現(xiàn)更好的抗體，而噬菌體展示允許選擇靶向特定表位的抗體。除了噬菌體展示外，細(xì)胞表面展示、核糖體展示和mRNA展示技術(shù)也已用于抗體生成。酵母和哺乳動(dòng)物細(xì)胞表面展示允許在真核細(xì)胞表面表達(dá)重組抗體片段。這使得能夠通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)分離抗原特異性細(xì)胞并發(fā)現(xiàn)高親和力結(jié)合物。

比較嵌合、人源化和人源抗體

嵌合、人源化或全人源抗體生產(chǎn)的目標(biāo)是減少針對(duì)抗體的免疫反應(yīng)，這種反應(yīng)帶有重復(fù)給藥導(dǎo)致中和和不良反應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)。對(duì)各種抗體療法進(jìn)行的大型人類臨床試驗(yàn)分析顯示，使用嵌合、人源化和人源抗體時(shí)，免疫原性逐漸下降。然而，該研究未檢驗(yàn)較低的免疫原性是否會(huì)導(dǎo)致更優(yōu)的腫瘤消退或患者生存期。幾種FDA和EMA批準(zhǔn)的嵌合、人源化和人源抗體靶向常見(jiàn)的癌癥抗原，如CD20、HER2和EGFR，盡管表位不同且結(jié)合特性不同。比較靶向CD20、HER2和EGFR的抗體的III期臨床試驗(yàn)已證明相似的總生存期和相似的治療相關(guān)停藥率，表明治療效果相當(dāng)。然而，顯著的HAMA免疫反應(yīng)阻礙了靶向雙唾液酸神經(jīng)節(jié)苷脂GD2的小鼠抗體的開(kāi)發(fā)，并且在自身免疫性疾病患者中使用利妥昔單抗觀察到了強(qiáng)烈的HACA免疫反應(yīng)。對(duì)HACA免疫反應(yīng)的擔(dān)憂，加上簡(jiǎn)化人源化和人源抗體生成的技術(shù)進(jìn)步，增加了這兩種格式的利用。進(jìn)入當(dāng)前臨床試驗(yàn)的抗體要么是人源化產(chǎn)品，要么是全人源產(chǎn)品，并且根據(jù)之前的試驗(yàn)結(jié)果，人源化和人源抗體在患者中往往表現(xiàn)出相似的治療效果。

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二、抗體療法的不同形式

根據(jù)其結(jié)構(gòu)和功能機(jī)制，抗體療法可分為三大主要格式：?jiǎn)翁禺愋钥贵w、雙特異性抗體以及與載荷偶聯(lián)的抗體。

單特異性抗體格式

單特異性抗體格式涉及結(jié)合靶抗原的全長(zhǎng)免疫球蛋白。在五種免疫球蛋白同種型中，只有IgG與新生兒Fc受體結(jié)合，導(dǎo)致半衰期較長(zhǎng)。靶向癌癥的抗體利用IgG同種型來(lái)利用這種延長(zhǎng)的半衰期，并且通常每21天給藥一次。大多數(shù)FDA和EMA批準(zhǔn)的抗體以及開(kāi)發(fā)中的抗體都使用單特異性IgG抗體格式。IgG抗體以四種亞類存在，大多數(shù)治療性抗體使用IgG1亞類。單特異性抗體格式的靶抗原是細(xì)胞表面蛋白，主要是實(shí)體瘤中過(guò)表達(dá)的生長(zhǎng)因子受體。對(duì)于血液系統(tǒng)惡性腫瘤，抗體通常靶向由不同免疫細(xì)胞亞群表達(dá)的細(xì)胞表面糖蛋白。

作用機(jī)制：抗體與癌細(xì)胞結(jié)合通過(guò)多種機(jī)制導(dǎo)致癌細(xì)胞死亡。直接阻斷來(lái)自生長(zhǎng)因子的生存信號(hào)和阻斷血管生成導(dǎo)致腫瘤血供破壞是這些抗體導(dǎo)致實(shí)體瘤消退的兩個(gè)主要機(jī)制。相比之下，血液系統(tǒng)惡性腫瘤中靶向的CD標(biāo)記物通常在促進(jìn)癌細(xì)胞存活方面沒(méi)有實(shí)質(zhì)性作用，相反，抗體通過(guò)募集和激活免疫效應(yīng)細(xì)胞來(lái)誘導(dǎo)細(xì)胞毒性。

每個(gè)IgG抗體亞類賦予抗體不同的效應(yīng)功能。IgG1亞類Fc段與巨噬細(xì)胞和自然殺傷細(xì)胞表達(dá)的激活Fcγ受體具有強(qiáng)親和力。FcγR結(jié)合導(dǎo)致巨噬細(xì)胞和NK細(xì)胞介導(dǎo)的抗體依賴性細(xì)胞毒性和抗體依賴性細(xì)胞吞噬作用，直接殺死癌細(xì)胞。最早獲得FDA批準(zhǔn)的兩種抗體是靶向惡性B細(xì)胞表達(dá)的CD20的利妥昔單抗和靶向乳腺癌細(xì)胞過(guò)表達(dá)的HER2的曲妥珠單抗，這兩種抗體都使用常見(jiàn)的IgG1同種型。IgG1誘導(dǎo)ADCC和ADCP的能力最終導(dǎo)致癌細(xì)胞死亡，并且可以通過(guò)Fc工程進(jìn)一步增強(qiáng)。IgG1亞類還結(jié)合補(bǔ)體蛋白C1q，通過(guò)補(bǔ)體依賴性細(xì)胞毒性導(dǎo)致癌細(xì)胞死亡。目前，市售的單克隆抗體主要由IgG1組成。除了效應(yīng)功能外，IgG亞類的選擇還基于結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性、循環(huán)半衰期、制造和監(jiān)管批準(zhǔn)經(jīng)驗(yàn)、缺乏免疫原性或意外副作用，以及公司開(kāi)發(fā)組合中特定IgG亞類的可用性。

單特異性抗體Fc工程化：大多數(shù)IgG1抗體效應(yīng)功能由Fc結(jié)構(gòu)域介導(dǎo)。數(shù)十年的研究增加了我們對(duì)Fc結(jié)構(gòu)域與不同F(xiàn)c受體相互作用的理解，并幫助設(shè)計(jì)了具有理想效應(yīng)功能的抗體。在臨床前研究中顯示活性增加的常見(jiàn)Fc結(jié)構(gòu)域修飾包括去巖藻糖基化或關(guān)鍵殘基的氨基酸取代，兩者都導(dǎo)致增強(qiáng)的ADCC和ADCP。

免疫檢查點(diǎn)抑制劑

在過(guò)去十年中，一類完全不同的靶向免疫細(xì)胞調(diào)節(jié)檢查點(diǎn)的單特異性抗體顯示出顯著的臨床療效。目前有11種FDA和EMA批準(zhǔn)的免疫檢查點(diǎn)抑制抗體正用于治療超過(guò)二十種不同類型的癌癥，包括肺癌、黑色素瘤、腎細(xì)胞癌、頭頸部鱗狀細(xì)胞癌，預(yù)計(jì)未來(lái)還會(huì)有更多此類抑制抗體獲得批準(zhǔn)。免疫檢查點(diǎn)抑制劑在大多數(shù)癌癥類型中顯示出20-30%的反應(yīng)率。然而，某些惡性腫瘤，如霍奇金淋巴瘤和皮膚癌、微衛(wèi)星不穩(wěn)定性高癌癥、PDL1表達(dá)升高的癌癥、或高突變負(fù)荷的癌癥，以及一些與病毒相關(guān)的癌癥，反應(yīng)率顯著更高。

作用機(jī)制：免疫檢查點(diǎn)阻斷抗體抑制負(fù)向調(diào)節(jié)T細(xì)胞的通路，從而重振細(xì)胞毒性T細(xì)胞以殺死癌細(xì)胞。在臨床試驗(yàn)中正在研究的超過(guò)20個(gè)免疫檢查點(diǎn)中，治療性抗體已獲得FDA或EMA批準(zhǔn)的三個(gè)蛋白質(zhì)或通路是CTLA4、PD1-PDL1和LAG3。CTLA4、PD1和LAG3的表達(dá)在T細(xì)胞刺激后被誘導(dǎo)，其主要目的是限制T細(xì)胞活化的程度。

PD1阻斷抗體是迄今為止使用最廣泛的免疫檢查點(diǎn)抑制劑。七種獲批的PD1阻斷抗體和兩種目前正在進(jìn)行臨床試驗(yàn)的抗體使用IgG4格式，與IgG1同種型相比，該格式不能有效激活補(bǔ)體級(jí)聯(lián)反應(yīng)且Fc受體結(jié)合較弱。因此，IgG4格式可能保護(hù)表達(dá)PD1的效應(yīng)T細(xì)胞免于被ADCC或CDC意外殺死。類似的IgG4格式也用于靶向LAG3的抗體瑞拉利單抗。所有IgG4抗體都攜帶S228P突變以防止Fab臂交換。

免疫檢查點(diǎn)抑制劑毒性：免疫檢查點(diǎn)阻斷抗體通過(guò)一般免疫激活介導(dǎo)癌細(xì)胞殺傷，這有時(shí)可能會(huì)錯(cuò)誤地針對(duì)健康組織。免疫檢查點(diǎn)抑制抗體具有非常獨(dú)特的不良反應(yīng)譜，稱為免疫相關(guān)不良事件。這些irAE包括各種表現(xiàn)，包括皮膚、胃腸道、肝臟、內(nèi)分泌、肺部、神經(jīng)和心臟事件。雖然不常見(jiàn)，但偶爾可能因免疫檢查點(diǎn)抑制而產(chǎn)生嚴(yán)重且可能致命的毒性。在許多情況下，需要使用糖皮質(zhì)激素、腫瘤壞死因子拮抗劑、霉酚酸酯或其他免疫調(diào)節(jié)劑進(jìn)行臨時(shí)免疫抑制來(lái)控制irAE。

雙特異性抗體格式

第二種格式包括多樣化的雙特異性抗體類別。與單特異性抗體不同，雙特異性抗體結(jié)合兩種不同的抗原或表位�？乖�可以位于同一靶細(xì)胞上或不同細(xì)胞上。靶向兩種不同細(xì)胞的雙特異性抗體大多是T細(xì)胞銜接器，將癌細(xì)胞與效應(yīng)T細(xì)胞交聯(lián)；因此，它們被稱為T細(xì)胞銜接器。交聯(lián)后，效應(yīng)T細(xì)胞被激活，通過(guò)釋放細(xì)胞毒性顆粒和淋巴因子殺死結(jié)合的靶癌細(xì)胞。另一類雙特異性抗體參與同一靶細(xì)胞表達(dá)的兩種不同抗原，例如兩種不同的生長(zhǎng)因子受體。此類雙特異性抗體通過(guò)阻斷靶生長(zhǎng)因子受體的增殖信號(hào)以及激活針對(duì)癌細(xì)胞的NK細(xì)胞和巨噬細(xì)胞來(lái)殺死靶細(xì)胞。

雙特異性T細(xì)胞銜接器：博納吐單抗在2014年獲得監(jiān)管批準(zhǔn)，導(dǎo)致了此類基于抗體的治療劑的爆炸性增長(zhǎng)。原型TCE雙特異性博納吐單抗是一種小的54 kDa融合蛋白，大小約為IgG抗體的三分之一。博納吐單抗由雙特異性抗體所需的最基本元件組成；一個(gè)靶向癌癥的scFv通過(guò)甘氨酸-絲氨酸肽連接子與一個(gè)結(jié)合T細(xì)胞的scFv連接。博納吐單抗通過(guò)抗CD19 scFv結(jié)合B細(xì)胞，同時(shí)通過(guò)抗CD3 scFv連接并激活T細(xì)胞，導(dǎo)致B細(xì)胞死亡。博納吐單抗在一系列B細(xì)胞惡性腫瘤中顯示出活性，并獲得批準(zhǔn)用于治療B細(xì)胞前體急性淋巴細(xì)胞白血病。

博納吐單抗的基本設(shè)計(jì)被后續(xù)獲得監(jiān)管批準(zhǔn)的TCE雙特異性抗體所采用。制藥公司通常對(duì)使用獨(dú)特架構(gòu)和方法組裝雙特異性抗體的獨(dú)特TCE格式進(jìn)行商標(biāo)注冊(cè)。常見(jiàn)格式包括雙特異性T細(xì)胞銜接器、Duobody、DART和Xmab，博納吐單抗使用BiTE格式。Tebentafusp是一種獨(dú)特的TCE雙特異性格式，名為ImmTAC，它將靶向黑色素瘤細(xì)胞表達(dá)的gp100-HLA-A02復(fù)合物的親和力增強(qiáng)的TCR與抗CD3 scFv連接起來(lái)。Tebentafusp在轉(zhuǎn)移性葡萄膜黑色素瘤患者中顯示出優(yōu)越的總生存期，于2022年獲得批準(zhǔn)。在過(guò)去2年中，六種靶向血液系統(tǒng)惡性腫瘤的新雙特異性抗體獲得監(jiān)管批準(zhǔn)。這些包括teclistamab和elranatamab、talquetamab用于多發(fā)性骨髓瘤，以及mosunetuzumab、epcoritamab和glofitamab用于B細(xì)胞淋巴瘤。然而，TCE雙特異性抗體在實(shí)體瘤中的批準(zhǔn)滯后。然而，針對(duì)實(shí)體惡性腫瘤的TCE雙特異性抗體臨床試驗(yàn)激增，為這一策略將擴(kuò)大其應(yīng)用范圍帶來(lái)了希望。最近關(guān)于TCE雙特異性抗體靶向DLL3在小細(xì)胞肺癌中的陽(yáng)性I期試驗(yàn)報(bào)告令人鼓舞，表明實(shí)體瘤障礙將被打破。

靶向同一細(xì)胞上不同抗原的雙特異性抗體：雙特異性抗體也被設(shè)計(jì)為結(jié)合靶癌細(xì)胞上的兩種不同抗原或表位，而不參與效應(yīng)T細(xì)胞。它們的抗癌作用是通過(guò)阻斷兩個(gè)增殖信號(hào)通路介導(dǎo)的，從而最大化抗腫瘤活性。除了其受體阻斷活性外，這些雙特異性抗體還可以被工程化以包含功能性的IgG1 Fc結(jié)構(gòu)域，使它們能夠通過(guò)非T細(xì)胞基礎(chǔ)的免疫效應(yīng)通路（如ADCC、ADCP和CDC）殺死癌細(xì)胞。阿米萬(wàn)他單抗是第一個(gè)靶向癌細(xì)胞表達(dá)的EGFR和MET的受體阻斷雙特異性抗體，并獲得監(jiān)管批準(zhǔn)用于治療具有外顯子20插入突變的非小細(xì)胞肺癌。阿米萬(wàn)他單抗比單受體結(jié)合抗體的組合更有效地阻斷驅(qū)動(dòng)肺癌亞群的EGFR和MET通路信號(hào)傳導(dǎo)。此外，阿米萬(wàn)他單抗的IgG1 Fc結(jié)構(gòu)域被工程化為具有低巖藻糖水平，這增強(qiáng)了FcγRIIIa結(jié)合和NK細(xì)胞介導(dǎo)的ADCC。類似的雙特異性設(shè)計(jì)被扎尼達(dá)他單抗采用，該抗體用每個(gè)Fab臂結(jié)合兩個(gè)不同的HER2表位。這些臂靶向HER2亞結(jié)構(gòu)域2和亞結(jié)構(gòu)域4，分別是帕妥珠單抗和曲妥珠單抗的結(jié)合位點(diǎn)，這兩種靶向HER2的抗體被批準(zhǔn)用于治療HER2+乳腺癌。臨床前研究表明，與曲妥珠單抗、帕妥珠單抗或曲妥珠單抗和帕妥珠單抗的組合相比，扎尼達(dá)他單抗增強(qiáng)了HER2聚集、受體下調(diào)并增加了CDC介導(dǎo)的HER2+癌細(xì)胞殺傷。在一項(xiàng)I期試驗(yàn)中，扎尼達(dá)他單抗在一系列HER2+實(shí)體瘤中顯示出鼓舞人心的活性。

雙特異性抗體毒性：TCE雙特異性抗體具有相似的不良反應(yīng)，因?yàn)樗鼈兪褂猛ㄟ^(guò)T細(xì)胞活化殺死靶細(xì)胞的共同抗癌機(jī)制。毒性水平與攜帶TCE雙特異性抗體靶點(diǎn)的細(xì)胞的總身體負(fù)擔(dān)有些相關(guān)。TCE雙特異性抗體誘導(dǎo)以發(fā)熱、不同程度的缺氧、低血壓和偶爾多器官衰竭為特征的全身性炎癥，統(tǒng)稱為細(xì)胞因子釋放綜合征。神經(jīng)毒性是與TCE雙特異性抗體相關(guān)的另一種獨(dú)特不良反應(yīng)，表現(xiàn)為意識(shí)模糊和震顫，以及言語(yǔ)和行為的改變。CRS和神經(jīng)毒性的病理生理學(xué)不完全清楚，可能與細(xì)胞因子水平升高有關(guān)。接受TCE雙特異性抗體治療的患者需要密切監(jiān)測(cè)，并可能需要使用糖皮質(zhì)激素或抗細(xì)胞因子藥物（如IL-6中和抗體托珠單抗）進(jìn)行免疫抑制。此外，已經(jīng)實(shí)施了幾種策略來(lái)預(yù)防或減少CRS和神經(jīng)毒性，包括逐漸上調(diào)TCE雙特異性抗體劑量、預(yù)防性使用糖皮質(zhì)激素，以及在開(kāi)始TCE雙特異性抗體治療前使用化療減少腫瘤負(fù)荷。受體阻斷雙特異性抗體不能激活T細(xì)胞，因此不會(huì)誘導(dǎo)通常在TCE雙特異性抗體中觀察到的CRS或神經(jīng)毒性。受體阻斷雙特異性抗體與單特異性抗體對(duì)應(yīng)物的不良反應(yīng)相似，例如阿米萬(wàn)他單抗引起的皮疹以及扎尼達(dá)他單抗引起的心力衰竭。

偶聯(lián)抗體形式

第三種主要格式涉及與毒性載荷連接的抗體，例如細(xì)胞毒性藥物、細(xì)菌或植物毒素，或放射性同位素，這增強(qiáng)了抗體殺死癌細(xì)胞的能力。在該組中，ADC是迄今為止使用最廣泛的格式，而毒素偶聯(lián)和放射性同位素偶聯(lián)抗體尚未被廣泛采用。

抗體藥物偶聯(lián)物：ADC是通過(guò)將腫瘤靶向抗體與細(xì)胞毒性藥物連接而構(gòu)建的。ADC分子與細(xì)胞表面抗原的結(jié)合導(dǎo)致其內(nèi)化，隨后在細(xì)胞內(nèi)釋放細(xì)胞毒性藥物。這使得細(xì)胞毒性藥物能夠選擇性地遞送至癌細(xì)胞，同時(shí)保留大部分健康組織。ADC的關(guān)鍵組成部分包括腫瘤靶向抗體、細(xì)胞毒性藥物和連接抗體與細(xì)胞毒性藥物的連接子。ADC的成功取決于這些關(guān)鍵組成部分的最佳選擇，以及用于將連接子連接到抗體的偶聯(lián)方法，這通常決定了藥物抗體比。

大多數(shù)ADC使用人源化或人源IgG1作為腫瘤靶向抗體。如上所述，使用IgG1的流行是由于其約21天的長(zhǎng)血漿半衰期，以及其結(jié)合Fc受體導(dǎo)致通過(guò)ADCC和ADCP增強(qiáng)靶細(xì)胞殺傷的能力。兩種ADC，吉妥珠單抗和奧英妥珠單抗，使用IgG4，其對(duì)FcγRII和FcγRIII的親和力較低，從而限制了ADCP，同時(shí)可能由于通過(guò)Fc受體非特異性攝取ADC進(jìn)入免疫細(xì)胞減少而降低毒性。

大多數(shù)連接子將細(xì)胞毒性藥物連接到IgG1抗體骨架上的隨機(jī)賴氨酸或半胱氨酸殘基。有效的連接子最大限度地減少細(xì)胞毒性藥物在血流中的早期釋放，同時(shí)促進(jìn)活性藥物在優(yōu)選靶向位置的受控釋放。連接子大致分為可裂解和不可裂解。多數(shù)ADC中使用可裂解連接子，例如肽連接子、腙連接子、二硫鍵連接子或CL2A連接子。為藥物連接開(kāi)發(fā)的第一個(gè)連接子之一是使用腙鍵的可裂解連接子。該連接子用于將抗腫瘤抗生素卡奇霉素連接到ADC吉妥珠單抗和奧英妥珠單抗。腙鍵被設(shè)計(jì)為在靶細(xì)胞溶酶體內(nèi)的酸性條件下分解以釋放卡奇霉素。然而，腙鍵可以在血漿中發(fā)生水解，導(dǎo)致藥物分子意外釋放，引起全身毒性。第二種可裂解連接子是肽連接子，需要溶酶體內(nèi)組織蛋白酶B介導(dǎo)的選擇性裂解。四種ADC使用mc-VC-PABC二肽連接子，該連接子由Seagen首次開(kāi)發(fā)用于生成ADC Brentuximab，該ADC使用與微管抑制劑單甲基澳瑞他汀E連接的靶向CD30的抗體。Brentuximab聯(lián)合化療在幾種不同淋巴瘤亞型的患者中顯示出顯著療效，被認(rèn)為是霍奇金淋巴瘤和CD30+外周T細(xì)胞淋巴瘤的標(biāo)準(zhǔn)一線治療。Brentuximab的成功導(dǎo)致了mc-VC-PABC二肽連接子的廣泛采用。Seagen與羅氏、安斯泰來(lái)和Genmab合作，使用mc-VC-PABC二肽連接子分別開(kāi)發(fā)靶向CD79B、nectin-4和TF的ADC。第三種可裂解連接子是二硫鍵連接子，其中連接子裂解由細(xì)胞內(nèi)高濃度的谷胱甘肽介導(dǎo)。具有二硫鍵連接子的ADC包括mirvetuximab，該藥在卵巢癌患者的III期試驗(yàn)中顯示出生存獲益。與可裂解連接子相比，不可裂解連接子對(duì)各種分解機(jī)制具有抵抗力。載荷在靶細(xì)胞溶酶體內(nèi)抗體降解后釋放。兩種ADC，曲妥珠單抗美坦新和belantamab mafodotin，使用不可裂解連接子進(jìn)行藥物連接。臨床前研究表明，由于不可裂解連接子的血漿穩(wěn)定性增加，對(duì)非靶細(xì)胞的毒性較低。然而，可裂解和不可裂解連接子尚未在臨床試驗(yàn)中進(jìn)行直接比較，一種相對(duì)于另一種的優(yōu)勢(shì)仍不清楚。

腫瘤細(xì)胞殺傷過(guò)程由連接到腫瘤靶向抗體的細(xì)胞毒性藥物執(zhí)行。該藥物通常是一種具有高細(xì)胞殺傷效力的小分子，通過(guò)三種機(jī)制之一誘導(dǎo)細(xì)胞死亡：直接DNA損傷、破壞微管網(wǎng)絡(luò)或抑制拓?fù)洚悩?gòu)酶活性。目前使用的藥物具有廣泛不同的IC，從5 nM到5 pM。然而，ADC的效力取決于藥物的IC和DAR。因此，具有高效力PBD載荷和相對(duì)較低DAR的loncastuximab tesirine與具有較低效力載荷Dxd但相對(duì)較高DAR的曲妥珠單抗德魯替康都能夠在幾種體內(nèi)模型中誘導(dǎo)完全腫瘤消退。具有高DAR和新型連接子設(shè)計(jì)的ADC的益處也在臨床試驗(yàn)中觀察到。曲妥珠單抗美坦新和曲妥珠單抗德魯替康共享相同的靶向HER2抗體。然而，曲妥珠單抗美坦新攜帶通過(guò)不可裂解連接子連接的微管抑制劑DM1，而曲妥珠單抗德魯替康利用通過(guò)可裂解連接子連接的藥物Dxd。在比較兩種ADC的III期試驗(yàn)中，曲妥珠單抗德魯替康顯示出更高的反應(yīng)率和總生存期。此外，曲妥珠單抗德魯替康延長(zhǎng)了表達(dá)低水平HER2的乳腺癌患者的生存期，使其成為第一個(gè)對(duì)HER2低乳腺癌有效的ADC。最近，fam-trastuzumab deruxtecan在一系列具有高HER2表達(dá)的實(shí)體瘤中顯示出腫瘤消退，并獲得了首個(gè)FDA批準(zhǔn)的腫瘤不可知HER2導(dǎo)向療法。

ADC毒性：ADC被認(rèn)為是靶向藥物，比傳統(tǒng)細(xì)胞毒性化療耐受性更好。然而，大多數(shù)患者在使用ADC時(shí)會(huì)出現(xiàn)某種形式的毒性。大多數(shù)ADC共有的毒性包括輸注反應(yīng)、血細(xì)胞減少、感染、肝酶升高、胃腸道癥狀和胚胎-胎兒毒性。某些毒性與特定載荷的使用有關(guān)，例如微管抑制劑引起的周圍神經(jīng)病變和卡奇霉素引起的肝毒性。其他毒性在靶向共同抗原的ADC中普遍存在。例如，靶向HER2的ADC可引起心力衰竭并介導(dǎo)間質(zhì)性肺病。

抗體-毒素偶聯(lián)物或免疫毒素：免疫毒素有兩個(gè)組成部分，一個(gè)靶向抗體或抗體的Fv，以及一個(gè)通常來(lái)自細(xì)菌或植物毒素的細(xì)胞毒性蛋白質(zhì)。靶向抗體或Fv結(jié)合靶細(xì)胞，允許選擇性遞送毒素。毒素來(lái)自細(xì)菌，如假單胞菌外毒素A和白喉毒素，或來(lái)自植物，如蓖麻毒素。理論上，任何用于生成ADC的靶向抗體都可用于免疫毒素。然而，盡管過(guò)去幾年有12種ADC獲批，但只有一種免疫毒素莫昔妥莫單抗帕蘇多托獲得FDA和EMA批準(zhǔn)用于治療毛細(xì)胞白血病。

莫昔妥莫單抗是一種融合蛋白，將CD22結(jié)合的Fv與截短的假單胞菌外毒素A組合，由美國(guó)國(guó)家癌癥研究所的I. Pastan開(kāi)發(fā)。進(jìn)入靶細(xì)胞后，PE38毒素與延伸因子2結(jié)合并阻斷蛋白質(zhì)合成。莫昔妥莫單抗在毛細(xì)胞白血病患者的臨床試驗(yàn)中顯示出41%的高完全緩解率，并于2018年獲得監(jiān)管批準(zhǔn)。然而，由于臨床使用率低，莫昔妥莫單抗的生產(chǎn)于2023年停止。

莫昔妥莫單抗和其他研究中的免疫毒素面臨若干挑戰(zhàn)，包括導(dǎo)致治療效果喪失的高免疫原性，以及導(dǎo)致毛細(xì)血管滲漏綜合征和溶血性尿毒癥綜合征等毒性的狹窄治療窗。莫昔妥莫單抗采用率低也可能是因?yàn)榻o藥的復(fù)雜性，包括毒性預(yù)防、治療前和治療后水化、需要安全監(jiān)測(cè)以避免不良反應(yīng)以及毛細(xì)胞白血病替代療法的可用性。盡管過(guò)去有幾項(xiàng)臨床試驗(yàn)評(píng)估了靶向BCMA、間皮素和其他癌癥相關(guān)抗原的免疫毒素的療效，但目前沒(méi)有一種處于監(jiān)管審查階段，也沒(méi)有預(yù)計(jì)在不久的將來(lái)獲得批準(zhǔn)。

抗體-放射性同位素偶聯(lián)物：抗體-放射性同位素偶聯(lián)物由與放射性同位素連接的靶向抗體組成。放射性同位素發(fā)射α粒子或β粒子，導(dǎo)致靶細(xì)胞中的DNA鏈斷裂，從而導(dǎo)致細(xì)胞死亡�？贵w-放射性同位素偶聯(lián)物不需要內(nèi)化即可誘導(dǎo)細(xì)胞死亡，這提供了相對(duì)于ADC和免疫毒素的獨(dú)特優(yōu)勢(shì)，包括旁觀者效應(yīng)。α粒子是大的帶正電粒子，由兩個(gè)質(zhì)子和兩個(gè)中子組成，有效范圍相對(duì)較短。相比之下，β粒子是小的帶負(fù)電電子，有效范圍更長(zhǎng)，但DNA損傷能量較低。β粒子發(fā)射體的例子包括碘-131、镥-177和釔-90。兩種FDA和/或EMA批準(zhǔn)的抗體-放射性同位素偶聯(lián)物，Y-替伊莫單抗和¹³¹I-托西莫單抗，將β粒子發(fā)射放射性核素連接到靶向CD20的抗體上，用于治療B細(xì)胞淋巴瘤。Y-替伊莫單抗和¹³¹I-托西莫單抗在臨床試驗(yàn)中顯示出65-80%的總體反應(yīng)率和20-30%的完全反應(yīng)率。兩項(xiàng)研究都觀察到一些可預(yù)測(cè)的治療相關(guān)不良反應(yīng)，包括健康骨髓暴露于輻射導(dǎo)致的長(zhǎng)期和嚴(yán)重血細(xì)胞減少、¹³¹I-托西莫單抗中放射性碘導(dǎo)致的甲狀腺功能減退，以及繼發(fā)性惡性腫瘤，如骨髓增生異常綜合征和白血病。盡管反應(yīng)率高，但這些藥物并未實(shí)現(xiàn)廣泛的臨床應(yīng)用，2012年只有75名患者接受了¹³¹I-托西莫單抗。結(jié)果，¹³¹I-托西莫單抗于2013年自愿撤市。Y-替伊莫單抗仍可用于復(fù)發(fā)或難治性低級(jí)別B細(xì)胞淋巴瘤患者，但報(bào)告表明只有少數(shù)患者接受這種治療。批準(zhǔn)數(shù)量有限和臨床采用率低可能是因?yàn)樾枰�多學(xué)科團(tuán)隊(duì)來(lái)開(kāi)發(fā)和在臨床部署這些分子。很少有中心具備這種能力，因此，抗體-放射性同位素偶聯(lián)物的使用落后于ADC。

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三、挑戰(zhàn)與未來(lái)展望

腫瘤學(xué)藥物開(kāi)發(fā)是一個(gè)艱巨的過(guò)程，成功率為3-7%。缺乏針對(duì)腫瘤學(xué)基于抗體的治療劑成功率的具體數(shù)據(jù)，但進(jìn)入I期試驗(yàn)的治療性抗體中約有18%會(huì)進(jìn)入藥物上市階段。這些低數(shù)字反映了藥物開(kāi)發(fā)過(guò)程中遇到的許多障礙。治療性抗體開(kāi)發(fā)是一項(xiàng)資源密集的多步驟操作。它需要生成針對(duì)靶抗原的多種抗體，然后選擇少數(shù)具有理想結(jié)合和生物物理特性的先導(dǎo)候選物。然后使用小鼠模型在體內(nèi)測(cè)試先導(dǎo)抗體的療效，使用非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物測(cè)試毒性和藥代動(dòng)力學(xué)，然后進(jìn)行首次人體臨床試驗(yàn)。多種在小鼠模型中顯示出有前景療效的抗體由于在非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物或首次人體試驗(yàn)中的毒性而未能進(jìn)入臨床開(kāi)發(fā)。盡管存在這些障礙，但一些抗體正在顯示出鼓舞人心的臨床前和臨床數(shù)據(jù)，并可能在未來(lái)幾年改變患者護(hù)理。

新靶點(diǎn)：實(shí)體瘤占新發(fā)癌癥患者的大多數(shù)。很大比例的實(shí)體瘤患者出現(xiàn)需要全身治療的轉(zhuǎn)移性疾病，而這很少能治愈。因此，轉(zhuǎn)移性肺癌、結(jié)腸癌、胰腺癌、乳腺癌、前列腺癌、肝癌和膽管癌共同導(dǎo)致了大多數(shù)癌癥死亡。然而，與血液系統(tǒng)惡性腫瘤相比，針對(duì)實(shí)體瘤的抗體開(kāi)發(fā)滯后，主要是由于缺乏可靶向的抗原。不同的淋巴瘤亞型約占所有癌癥死亡的3%，但有五個(gè)腫瘤抗原被治療性抗體靶向。相比之下，導(dǎo)致約21%癌癥死亡的肺癌只有一個(gè)可靶向的腫瘤抗原。此外，胰腺癌、前列腺癌和腦癌完全缺乏FDA和/或EMA批準(zhǔn)的治療性抗體。這種差異主要是因?yàn)榱馨土龊凸撬枇銎鹪从谡�常的B細(xì)胞，后者表達(dá)獨(dú)特的可靶向抗原。此外，根除正常B細(xì)胞不會(huì)導(dǎo)致不可耐受的后果。不幸的是，靶抗原發(fā)現(xiàn)在實(shí)體瘤中產(chǎn)生的線索很少。因此，新靶點(diǎn)的識(shí)別可能需要涉及對(duì)大量患者樣本進(jìn)行單細(xì)胞測(cè)序，以尋找在癌癥和正常組織中差異表達(dá)的抗原。此外，最近的臨床試驗(yàn)顯示，靶向claudins、HER3、FGFR2B、DLL3、CTGF和STEAP1的抗體顯示出令人鼓舞的結(jié)果。

最后，規(guī)避缺乏腫瘤特異性抗原的一種創(chuàng)新方法是組合靶向多種抗原。大多數(shù)癌癥缺乏在健康組織中不存在的真正特異性抗原的表達(dá)。因此，靶向僅在腫瘤中共表達(dá)而在健康組織中不共表達(dá)的抗原組合可能提供可行的治療途徑。利用需要兩個(gè)或三個(gè)靶點(diǎn)激活細(xì)胞毒性機(jī)制的布爾邏輯AND門的臨床前研究已證明腫瘤消退，但它們尚未在臨床試驗(yàn)中進(jìn)行測(cè)試。

一些細(xì)胞表面蛋白聚糖，如硫酸軟骨素和硫酸乙酰肝素，是癌癥和其他人類疾病中信號(hào)通路的重要調(diào)節(jié)劑。硫酸軟骨素蛋白聚糖已被證明可促進(jìn)腫瘤血管化并調(diào)節(jié)與腫瘤生長(zhǎng)相關(guān)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，并且在多種癌癥類型中表達(dá)。Glypicans是糖基磷脂酰肌醇錨定的細(xì)胞表面HSPG。幾種glypicans如GPC1、GPC2和GPC3在癌癥中過(guò)表達(dá)，表明它們是潛在的腫瘤相關(guān)抗原。針對(duì)GPC1、GPC2和GPC3的抗體和CAR T細(xì)胞已分別開(kāi)發(fā)用于治療胰腺癌、神經(jīng)母細(xì)胞瘤和肝癌。

腫瘤特異性抗原：目前大多數(shù)獲批的基于抗體的治療劑靶向腫瘤相關(guān)抗原或組織特異性抗原。腫瘤相關(guān)抗原，如HER2，由癌細(xì)胞過(guò)表達(dá)，但也由一部分正常組織表達(dá)，盡管水平較低。癌癥和正常組織之間表達(dá)水平的差異提供了治療窗口。組織特異性抗原，如CD20，在癌細(xì)胞和正常細(xì)胞中以相似的水平表達(dá)。靶向此類組織特異性抗原的療法旨在消除正常細(xì)胞和癌細(xì)胞，因?yàn)檎�常B細(xì)胞的耗竭在臨床上是可耐受的。靶向CD19、CD20、CD38和BCMA的B細(xì)胞譜系癌癥療法代表了最成功的組織特異性治療性抗體實(shí)例。

腫瘤特異性抗原的主要例子是新抗原，這些是由MHC分子呈遞的突變肽。突變肽是攜帶氨基酸變化的蛋白質(zhì)的短蛋白水解產(chǎn)物，這些變化源于突變，這是癌細(xì)胞的標(biāo)志。來(lái)自突變癌癥驅(qū)動(dòng)基因（如BRAF、RAS、PIK3CA、TP53和異檸檬酸脫氫酶）的公共新抗原提供了對(duì)癌細(xì)胞極為獨(dú)特的靶點(diǎn)，可用于造福患者。這些公共新抗原目前正被雙特異性抗體靶向，并在臨床前研究中顯示出針對(duì)攜帶TP53和RAS突變的癌癥的令人鼓舞的活性。

細(xì)胞內(nèi)抗原：抗體無(wú)法穿透細(xì)胞膜，因此只能靶向細(xì)胞表面抗原。細(xì)胞內(nèi)抗原可以與MHC分子結(jié)合呈遞在細(xì)胞表面，使其可靶向。通過(guò)這種方式，tebentafusp靶向細(xì)胞內(nèi)抗原gp100，該抗原在黑色素瘤中過(guò)表達(dá)，并與HLA-A*02:01結(jié)合呈遞在細(xì)胞表面。現(xiàn)在正在開(kāi)發(fā)抗體以靶向類似癌癥特異性過(guò)表達(dá)的細(xì)胞內(nèi)蛋白，如hTERT、MUC1、NY-ESO1、TARP、p53、WT1和PRAME，其中靶向PRAME在臨床試驗(yàn)中顯示出令人鼓舞的初步結(jié)果。

腫瘤微環(huán)境中的抗原：癌癥在復(fù)雜的免疫細(xì)胞、成纖維細(xì)胞和細(xì)胞外基質(zhì)混合物中發(fā)展，這被稱為腫瘤微環(huán)境。目前的研究正在檢查腫瘤微環(huán)境中免疫細(xì)胞的作用，如腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞和髓源性抑制細(xì)胞，這些細(xì)胞已知會(huì)驅(qū)動(dòng)對(duì)免疫檢查點(diǎn)抑制劑的耐藥性。因此，耗竭或阻斷這些免疫抑制細(xì)胞的功能可能使腫瘤對(duì)免疫檢查點(diǎn)抑制劑敏感。

早期臨床試驗(yàn)證明了通過(guò)靶向CSF1R、TREM1和TREM2進(jìn)行抗體介導(dǎo)的TAM抑制的安全性和可行性。臨床前研究還表明，使用激動(dòng)性CD40單克隆抗體增強(qiáng)腫瘤微環(huán)境中樹(shù)突狀細(xì)胞的功能可以增強(qiáng)T細(xì)胞介導(dǎo)的腫瘤消退。所有對(duì)抗腫瘤微環(huán)境內(nèi)免疫抑制狀態(tài)的抗體目前正在II/III期試驗(yàn)中進(jìn)行測(cè)試，這將決定它們的最終效用。

靶向低密度抗原：目前批準(zhǔn)的ADC和雙特異性抗體靶向相對(duì)豐富的抗原，如CD19、CD20和BCMA，每個(gè)癌細(xì)胞約有1,000至50,000個(gè)拷貝。靶向新抗原的主要挑戰(zhàn)源于它們?cè)诎┘?xì)胞表面的低豐度，一些細(xì)胞表達(dá)1-10個(gè)靶抗原拷貝。除了新抗原外，有效靶向腫瘤相關(guān)或組織特異性抗原也可能受到其可變細(xì)胞表面密度的影響。此外，治療壓力也可以選擇具有低靶抗原表達(dá)的癌細(xì)胞克隆。臨床前研究表明，雙特異性抗體能夠殺死每個(gè)細(xì)胞表達(dá)低至1-10個(gè)抗原的癌細(xì)胞，而ADC需要1,000個(gè)或以上的拷貝才能殺死細(xì)胞。未修飾的全長(zhǎng)抗體可能需要更高的靶抗原表達(dá)。靶向此類低密度抗原仍然是一個(gè)挑戰(zhàn)，優(yōu)化的抗體工程正在使其在臨床前研究中有效靶向個(gè)位數(shù)水平的新抗原成為可能。

新型免疫檢查點(diǎn)抑制劑：伊匹木單抗在2011年的批準(zhǔn)迎來(lái)了免疫治療時(shí)代。免疫檢查點(diǎn)阻斷劑具有前所未有的能力，可以在一些復(fù)發(fā)性實(shí)體瘤患者中誘導(dǎo)長(zhǎng)期緩解，這導(dǎo)致了一系列臨床試驗(yàn)的激增。FDA和EMA已批準(zhǔn)11種不同版本的靶向CTLA4、PD1和PDL1的抗體，用于超過(guò)20種癌癥類型的超過(guò)65種不同適應(yīng)癥。在CTLA4、PD1和PDL1靶向取得初步成功后，一系列額外的免疫檢查點(diǎn)被探索，以誘導(dǎo)一系列癌癥類型的緩解。

除了在黑色素瘤中靶向LAG3的瑞拉利單抗外，其他所有藥物尚未在III期試驗(yàn)中證明獲得監(jiān)管批準(zhǔn)所需的治療活性。類似地，阻斷CD47的巨噬細(xì)胞檢查點(diǎn)抑制劑magrolimab在早期試驗(yàn)中顯示出令人鼓舞的活性，但由于缺乏療效，在MDS和AML患者中的III期試驗(yàn)被終止。目前新型免疫檢查點(diǎn)阻斷劑的表現(xiàn)低于預(yù)期，導(dǎo)致制藥行業(yè)將重點(diǎn)放在PD1-PDL1領(lǐng)域。

新型抗體格式：所有全長(zhǎng)治療性抗體都使用IgG同種型。臨床前研究和早期試驗(yàn)正在探索五聚體IgM格式，與IgG格式中的兩個(gè)結(jié)合位點(diǎn)相比，它具有十個(gè)抗原結(jié)合位點(diǎn)。與靶向相同表位的IgG抗體相比，這提供了更高的結(jié)合親合力。一個(gè)例子是IGM-8444，一種高親合力五聚體IgM激動(dòng)抗體，靶向死亡受體5，該抗體已在小鼠模型中顯示出腫瘤消退，并已進(jìn)入I期試驗(yàn)。

新型雙特異性格式：TCE雙特異性格式通過(guò)提高療效同時(shí)減少不良反應(yīng)而不斷發(fā)展。目前有超過(guò)200種雙特異性抗體處于臨床開(kāi)發(fā)階段，其中大多數(shù)使用TCE方法靶向?qū)嶓w瘤。Glofitamab和xaluritamig在臨床試驗(yàn)中均顯示出療效，并共享獨(dú)特的2:1 T細(xì)胞銜接雙特異性格式，具有對(duì)靶點(diǎn)的二價(jià)結(jié)合和對(duì)CD3的單價(jià)結(jié)合。與傳統(tǒng)的1:1靶點(diǎn)與CD3結(jié)合設(shè)計(jì)相比，這種格式可能提供更高的腫瘤細(xì)胞殺傷能力。IgM格式TCE雙特異性抗體由于使用五聚體IgM而具有更令人印象深刻的10:1靶點(diǎn)與CD3結(jié)合比。高靶點(diǎn)與CD3結(jié)合比設(shè)計(jì)允許高親合力靶點(diǎn)結(jié)合，可能產(chǎn)生更高的靶點(diǎn)細(xì)胞毒性，同時(shí)減少細(xì)胞因子分泌。Imvotamab的I期試驗(yàn)已證明在晚期B細(xì)胞惡性腫瘤患者中具有幾個(gè)完全緩解。

雙特異性免疫檢查點(diǎn)阻斷劑：雙特異性格式也被用于同時(shí)抑制兩個(gè)免疫檢查點(diǎn)，以增強(qiáng)T細(xì)胞活化，超越兩種單特異性免疫檢查點(diǎn)阻斷劑組合所能達(dá)到的效果。靶向PD1xLAG3、PD1xCTLA4和PDL1xCTLA4的雙特異性免疫檢查點(diǎn)阻斷劑在早期臨床試驗(yàn)中顯示出令人鼓舞的療效。雖然最初的雙特異性免疫檢查點(diǎn)阻斷劑組專注于抑制臨床已確立的免疫檢查點(diǎn)，但臨床前研究正在調(diào)查類似的雙特異性免疫檢查點(diǎn)阻斷劑是否可以通過(guò)靶向新型免疫受體來(lái)誘導(dǎo)抗腫瘤免疫。

三特異性抗體：三特異性抗體具有同時(shí)與三種不同抗原相互作用的能力。這種功能使三特異性抗體能夠與兩種不同的癌癥相關(guān)抗原相互作用，同時(shí)在B細(xì)胞惡性腫瘤的背景下使用第三個(gè)結(jié)合域與細(xì)胞毒性T細(xì)胞結(jié)合。這種創(chuàng)新方法有助于減輕由于單一抗原丟失而引起的治療耐藥性，因?yàn)榘┘?xì)胞必須同時(shí)下調(diào)兩種抗原以逃避殺傷�；蛘�，三特異性抗體被設(shè)計(jì)為與兩個(gè)T細(xì)胞受體相互作用，從而向癌細(xì)胞傳遞更有效的激活信號(hào)。

納米抗體：可能導(dǎo)致抗體工程重要范式變化的一個(gè)研究領(lǐng)域是單域抗體的開(kāi)發(fā)。納米抗體主要來(lái)源于駱駝科重鏈抗體，體積小，易于生產(chǎn)，穩(wěn)定，并且能夠穿透腫瘤或病毒抗原中的隱藏位點(diǎn)。納米抗體通常從駱駝科來(lái)源的噬菌體展示文庫(kù)中分離，最近也從轉(zhuǎn)基因小鼠中分離。納米抗體具有長(zhǎng)的CDR3環(huán)，可以穿透抗原表面的空腔。第一個(gè)基于納米抗體的靶向BCMA的CAR T細(xì)胞已獲得FDA批準(zhǔn)，并且與基于抗體的CAR T細(xì)胞相比顯示出更高的療效。靶向CD19或CD20和HER2的納米抗體來(lái)源藥物目前正在淋巴瘤和乳腺癌患者的臨床試驗(yàn)中進(jìn)行測(cè)試。納米抗體是否會(huì)提供比當(dāng)前基于抗體的藥物更高的療效仍有待觀察。

可激活抗體：腫瘤微環(huán)境通常表現(xiàn)出較低的pH，含有活性蛋白酶酶，并具有正常組織缺乏的特定抗原組合。這些獨(dú)特的特性被用來(lái)選擇性地靶向癌細(xì)胞，使用可激活抗體，這些抗體根據(jù)環(huán)境條件的變化獲得或失去功能。在抗體序列的某些位置添加組氨酸殘基使其能夠與靶抗原進(jìn)行pH依賴性結(jié)合。具有這種掩蔽機(jī)制的抗體通常被稱為前體藥物療法，正被用于改善PDL1、CTLA4、EGFR、CD166和CD71在一系列實(shí)體瘤和血液系統(tǒng)惡性腫瘤中的靶向。

新型偶聯(lián)抗體：調(diào)節(jié)連接子設(shè)計(jì)和增加DAR可能會(huì)增強(qiáng)治療益處。例如，具有高DAR的靶向細(xì)胞表面糖蛋白TROP2的ADC是第一個(gè)改善三陰性乳腺癌患者生存期的ADC。第一三共開(kāi)發(fā)的創(chuàng)新四肽連接子用于曲妥珠單抗德魯替康，掩蓋了載荷DXd的疏水性，并允許均勻連接大量藥物，同時(shí)保持良好的藥代動(dòng)力學(xué)并最大限度地減少藥物在血漿中的過(guò)早釋放。這種連接子-載荷組合現(xiàn)在正被幾種接近批準(zhǔn)或處于臨床試驗(yàn)階段的ADC采用。最后，新型藥物載荷，如蛋白質(zhì)降解劑、RNA聚合酶抑制劑、BCL-xL抑制劑、Toll樣受體激動(dòng)劑和干擾素基因刺激劑激動(dòng)劑，預(yù)計(jì)將通過(guò)使用新型殺傷機(jī)制來(lái)改進(jìn)ADC。

免疫毒素偶聯(lián)物：免疫毒素的一個(gè)明顯限制是抗毒素免疫反應(yīng)的產(chǎn)生，這會(huì)縮短半衰期并降低療效。目前的工作重點(diǎn)是去除被宿主免疫細(xì)胞識(shí)別的表位，以降低假單胞菌外毒素的免疫原性。這種修飾的免疫毒素可能會(huì)提高療效，并允許免疫毒素靶向一系列惡性腫瘤。白介素-毒素偶聯(lián)物的生成是該領(lǐng)域的另一項(xiàng)發(fā)展，并利用了癌細(xì)胞中白介素受體的過(guò)表達(dá)。Tagraxofusp是一種靶向IL3RA的細(xì)胞毒素，由IL-3與白喉毒素融合而成，在母細(xì)胞性漿細(xì)胞樣樹(shù)突狀細(xì)胞腫瘤患者中顯示出有效性。類似地，denileukin diftitox是一種IL-2R靶向細(xì)胞毒素，由IL-2與白喉毒素融合而成，在皮膚T細(xì)胞淋巴瘤患者中有效。然而，這些IL-毒素偶聯(lián)物不被視為基于抗體的藥物，因?yàn)樗鼈兪褂檬荏w配體而非scFv進(jìn)行腫瘤靶向。

放射性同位素偶聯(lián)物：在基于小分子和肽的放射性同位素偶聯(lián)物在實(shí)體瘤中取得成功后，人們對(duì)放射性同位素偶聯(lián)物重新產(chǎn)生了一些興趣。將镥-177與結(jié)合前列腺特異性膜抗原的小分子或與結(jié)合生長(zhǎng)抑素受體的肽類似物偶聯(lián)，分別在前列腺癌和神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤患者中顯示出顯著的腫瘤消退，從而獲得FDA批準(zhǔn)。此類腫瘤靶向小分子-放射性同位素或肽-放射性同位素偶聯(lián)物的行為類似于抗體-放射性同位素偶聯(lián)物，但具有不同的結(jié)構(gòu)和藥代動(dòng)力學(xué)。

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結(jié)語(yǔ)

總之，基于抗體的治療劑因其抗體與靶點(diǎn)結(jié)合所能提供的精確水平而在腫瘤學(xué)領(lǐng)域具有巨大前景。主要挑戰(zhàn)仍然存在，但新靶點(diǎn)和各種新穎的設(shè)計(jì)和工程策略有望為許多這些挑戰(zhàn)提供解決方案。獲得監(jiān)管批準(zhǔn)的更有效的基于抗體的治療劑的爆炸式增長(zhǎng)可能會(huì)延續(xù)過(guò)去二十五年顯示的趨勢(shì)。

參考文獻(xiàn)：

Cancer therapy with antibodies. Nat Rev Cancer. 2024 Jun;24(6):399-426.

       原文標(biāo)題 : 抗體在癌癥治療中的應(yīng)用：機(jī)制、進(jìn)展與未來(lái)展望